定義:在一個(gè)凝膠電泳系統(tǒng)中不同部位的pH、離子強(qiáng)度、緩沖液成分或凝膠孔隙大小不同的凝膠電泳。其目的在于提高電泳分離的范圍和分辨率。
無(wú)血清培養(yǎng)基,顧名思義,就是在細(xì)胞培養(yǎng)中不需要添加血清,但是在某些應(yīng)用中可能要添加生長(zhǎng)因子或細(xì)胞因子。無(wú)血清培養(yǎng)基中添加了血清的主要成分:粘附因子、生長(zhǎng)因子、必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和激素等,能減少血清帶來(lái)的不利因素,使細(xì)胞培養(yǎng)的條件更穩(wěn)定。經(jīng)歷了天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基后,無(wú)血清培養(yǎng)基和無(wú)血清培養(yǎng)成為當(dāng)今細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域的一大趨勢(shì)。采用無(wú)血清培養(yǎng)可簡(jiǎn)化純化和鑒定各種細(xì)胞產(chǎn)物的程序,避免病毒污染造成的危害。
常用的有PDA培養(yǎng)基、孟加拉紅培養(yǎng)基、高鹽察氏培養(yǎng)基、酵母粉葡萄糖氯霉素瓊脂等等。培養(yǎng)7天后如果菌落長(zhǎng)毛的就是霉菌,沒(méi)有毛的就是酵母菌,形態(tài)可能會(huì)不一樣,因?yàn)榻湍妇恢挂环N,不同的酵母菌長(zhǎng)出來(lái)的形態(tài)會(huì)不一樣。
融合試驗(yàn)最大的失敗原因是污染,融合成功的關(guān)鍵是提供一個(gè)無(wú)毒無(wú)菌的操作環(huán)境。
無(wú)菌檢查法系用于檢査藥典要求無(wú)菌的藥品生物制品、醫(yī)療器具、原料、輔料及其他品種是否無(wú)菌的一種方法。
泛素化是指泛素分子在一系列酶的作用下共價(jià)結(jié)合到靶蛋白上的過(guò)程。這個(gè)過(guò)程涉及三種關(guān)鍵酶:E1泛素激活酶、E2泛素結(jié)合酶和E3泛素連接酶。首先,E1在ATP供能下激活泛素分子,然后將其轉(zhuǎn)移到E2上,最后E3識(shí)別并結(jié)合特定的底物蛋白,催化泛素從E2轉(zhuǎn)移到底物蛋白的賴(lài)氨酸殘基上,形成異肽鍵,完成泛素化修飾。
將血清脂蛋白用脂類(lèi)染料(如蘇丹黑或油紅O等)進(jìn)行預(yù)染。再將預(yù)染過(guò)的血清置于瓊脂糖凝膠板上進(jìn)行電泳分離。通電后,脂蛋白向正極移動(dòng),并分離為幾個(gè)區(qū)帶。
瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂或瓊脂糖作支持介質(zhì)的一種電泳方法。對(duì)于分子量較大的樣品,如大分子核酸、病毒等,一般可采用孔徑較大的瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳分離。
內(nèi)毒素可以與特定的檢測(cè)試劑發(fā)生反應(yīng),基于這一原理開(kāi)發(fā)出內(nèi)毒素的檢測(cè)方法。常見(jiàn)的檢測(cè)方法包括凝膠法、重組C因子法、動(dòng)態(tài)比濁法等。