不同的抑制劑作用機(jī)制不同，有的抑制劑與底物競爭酶的活性中心，從而阻礙底物與酶的結(jié)合，稱為競爭性抑制；有的抑制劑與酶活性中心以外的基團(tuán)結(jié)合，使酶的構(gòu)象改變而不能與底物結(jié)合，稱為非競爭性抑制。
在使用分光光度計(jì)過程中，應(yīng)注意安全。避免接觸高壓電源和高溫部件，以免發(fā)生觸電和燙傷事故。同時，應(yīng)遵守實(shí)驗(yàn)室的安全規(guī)定，正確使用化學(xué)試劑和樣品。
酶促化學(xué)反應(yīng)中的反應(yīng)物稱為底物，一個酶分子在一分鐘內(nèi)能引起數(shù)百萬個底物分子轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物，酶在反應(yīng)過程中并不消耗。但是酶實(shí)際上是參與反應(yīng)的，只是在一個反應(yīng)完成后，酶分子本身立即恢復(fù)原狀，又能進(jìn)行下一次反應(yīng)。許多實(shí)驗(yàn)證明，酶和底物在反應(yīng)過程中形成絡(luò)合物。
標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度的確定不僅需要科學(xué)的計(jì)算和嚴(yán)格的操作，還需要結(jié)合實(shí)驗(yàn)過程中的實(shí)際情況進(jìn)行動態(tài)調(diào)整和優(yōu)化。
固定劑與甲醛不同，戊二醛的這一步反應(yīng)是不可逆的，而且需要氧氣的參與。由于大塊的樣品內(nèi)部氧氣供應(yīng)不足，戊二醛在大塊樣品的內(nèi)部無法形成穩(wěn)定的生成物，會導(dǎo)致樣品內(nèi)部的固定效果不佳。因而在使用戊二醛固定時，小塊的樣品固定效果較為理想。戊二醛通過交聯(lián)作用固定蛋白質(zhì)的過程會伴隨氫離子的釋放，使樣品pH值降低。為了維持pH值穩(wěn)定在最佳水平，在戊二醛的固定劑中要加入足量的緩沖液。
鐵染色原理：人體內(nèi)有一定量的以鐵蛋白和含鐵血黃素形式貯存的鐵元素，這些鐵在酸化的低鐵氰化鉀溶液中反應(yīng)，生成藍(lán)色的亞鐵氰化鐵沉淀（普魯士藍(lán)），定位于含鐵的部位。
酶固定化后一般穩(wěn)定性增加，易從反應(yīng)系統(tǒng)中分離，且易于控制，能反復(fù)多次使用。便于運(yùn)輸和貯存，有利于自動化生產(chǎn)，但是活性降低，使用范圍減小，技術(shù)還有發(fā)展空間。固定化酶是近十余年發(fā)展起來的酶應(yīng)用技術(shù)，在工業(yè)生產(chǎn)、化學(xué)分析和醫(yī)藥等方面有誘人的應(yīng)用前景。
在保存和處理分選后的細(xì)胞時，要始終注意無菌操作，避免細(xì)胞污染，同時根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)需求和細(xì)胞特性選擇合適的方法。
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